Vid hantering av mikroorganismer är det viktigt att korrekt använda aseptisk teknik-både för att förhindra att dina mikroorganismer blir förorenade av yttre krafter, såväl som för att skydda dig själv och människorna omkring dig.
Steg
Steg 1. Skydda dig själv
Bind upp långt hår och bära en labrock och skyddsglasögon.
Steg 2. Tvätta händerna och din arbetsyta
Tvätta händerna med vatten och tvål och spraya ner bänken med 70% etanol.
Steg 3. Lägg ut all din utrustning
Se till att du har allt klart innan du börjar.
Steg 4. Slå på bunsenbrännaren så högt som möjligt
Du behöver den för att sterilisera din utrustning, och det uppåtgående utkastet förhindrar att yttre föroreningar landar på din kultur.
Vrid kragen så att luftflödet är helt öppet
Steg 5. Sterilisera inokulationsslingan
Håll den i ungefär 45 ° nedåt och rör den långsamt genom lågan så att den lyser rödvit.
- Det är lättast att hålla öglan mellan tummen och pekarfingret och stödja den med långfingret.
- Den hetaste delen av lågan är precis vid spetsen av den inre, blå eldkonen.
Steg 6. Använd din andra hand för att ta tag i din ursprungliga kultur
- Om det är en tallrik, håll den och vänd upp locket tillräckligt för att få öglan inuti.
- Om det är ett rör med lock, använd det rosa fingret på handen som du håller ympslingan med för att ta bort locket, dra sedan snabbt rörets öppning genom bunsenbrännarens låga två gånger. Detta kallas flammande och dödar allt som vill komma in i röret och skapar en konvektionsström som tvingar ut luft ur röret så att ingenting kan få det. Fortsätt hålla på locket med din pinky för följande steg.
Steg 7. Inokulera
Rör inokulationsslingan till en koloni du vill hämta. Om du ympar från flytande buljong, doppa inokulationsslingan i röret och skaka öglan för att se till att du får tillräckligt med bakterier.
Steg 8. Stäng den ursprungliga kulturen
Om det är en tallrik, stäng bara locket och lägg ner det igen. Om det är ett rör, dra öppningen genom bunsenbrännarens låga två gånger och sätt sedan tillbaka locket.
Steg 9. Öppna den nya plattan
Som tidigare, använd din fria hand för att vrida upp locket precis tillräckligt bredt för att få in öglan
Steg 10. Platta bakterierna
Dra lätt inokulationsslingan över ytan, var försiktig så att du inte tränger in i agaren.
Ett vanligt strimmönster är kvadrantmetoden
Steg 11. Stäng tallriken
Steg 12. Sterilisera inokulationsslingan
Som tidigare, håll den i en 45 ° nedåtgående vinkel och rör den långsamt genom lågan så att den blir rödvit varm.
Tips
- I allmänhet är handskar inte nödvändiga. Alla ovanstående steg tjänar till att skydda både dig själv och dina bakterier, så risken för kontaminering är mycket låg. Handskar kan ge otäcka brännskador om du av misstag vidrör dem med den heta inokulationsslingan.
- Tänk på att du arbetar med eld. Det är ingen stor sak, bara se till att du vet vad du ska göra om du bränner dig; pausa experimentet, skölj brännskadorna med vatten och meddela din chef om det behövs.
- Om du gör flera körningar med att behöva använda aseptisk teknik är det inte nödvändigt att stänga av bunsenbrännaren helt mellan körningarna - vrid bara ner den till pilotlågan och stäng den bara hela vägen när du är helt klar.
